親和層析 | 蔬菜好營養
![親和層析](https://i.imgur.com/4LfH9YV.jpg)
2015年8月26日—親和層析(Affinitychromatography)...其原理像是酵素與其受質、抗體與抗原的關係,舉例來說,利用瓊脂糖(agarose)或是有孔洞的玻璃來夾帶親和配 ...
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親和層析 (Affinity chromatography) 國立臺灣師範大學化學系研究生 陳培杰
一般的管柱層析(Column chromatography)可分為氣相層析(Gas chromatography)和液相層析(Liquid chromatography),如果要再細分,可分為氣液相層析、氣固相層析……等,還有幾種比較特別的層析方法,像是利用離子交換層析法或者利用是孔徑大小不同達到分離效果的層析,本篇要介紹的親和層析也是比較特殊類的層析。
親和層析主要應用於生物大分子的純化,利用生物大分子來跟配體之間形成可逆結合的能力,使其分離。其原理像是酵素與其受質、抗體與抗原的關係,舉例來說,利用瓊脂糖(agarose)或是有孔洞的玻璃來夾帶親和配體(affinity ligand),然而這些親和配體對每種分子的鍵結強度會有所不同。至於動相則要有兩種特性:一、是要能讓想要的分子能與親和配體有好的鍵結;二、則是能夠減弱不想要的分子與親和配體的鍵結,通常都是改變酸鹼值來改變這兩種情形。
在親和配體的選擇上,有下列條件為佳:
與產物的專一性、親和性越大越好 與產物結合後在一定條件下能解離甚至不會損傷產物及配體 能穩定的附著在基團上,使產物與配體解離時不受影響在團基的選擇上,有下列條件為佳:
具有化學惰性,不會因為酸鹼值、濃度、溫度而改變結構 具有多孔洞且平均分配圖一 親和層析示意圖(來源:參考資料3)
圖二 親核層析圖譜示意圖(來源:參考資料3)
由圖二得知當混和物進入管柱後,不要的分子會...
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