TW202221134A | 蔬菜好營養
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本發明描述一種新形態半乳糖基轉移酶的用途,其用於產生半乳糖化雙醣與寡醣。...岩藻糖合成酶的基因、過度表現GDP-甘露糖4,6-脫水酶(GDP-mannose4,6-dehydratase)的 ...
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本發明屬於合成生物學與代謝工程學的技術領域,且亦屬於經代謝改造細胞發酵的領域。
一般以結合蛋白質與脂質的醣結合形式存在的雙醣或寡醣涉及許多生命現象,例如分化、發育、與受精的發育及進展相關的生物識別過程、胚胎形成、發言、轉移(metastasis)以及宿主病原體黏著。寡醣在體液與人乳中也可以未結合聚醣的形式存在,其中它們也調節了重要的發育與免疫過程(Bode, Early Hum. Dev. 1-4 (2015); Reily et al., Nat. Rev. Nephrol. 15, 346-366 (2019); Varki, Glycobiology 27, 3-49 (2017))。科學界與商業界對半乳糖化雙醣與寡醣具有相當廣泛的功能而受到科學界與商業界的關注。然而,半乳糖化雙醣與寡醣的可得性有限,因為其生產依賴 化學或化學酵素合成,或須從如動物乳汁的自然來源進行純化而得。化學合成方法耗時耗力且因為涉及大量步驟而難以量產。使用醣基轉移酶的酵素方法相較於化學合成提供了許多優點。醣基轉移酶從活化核苷酸糖供給者(donor)催化糖的部分(sugar moiety)轉移至醣類或非醣類接受者(acceptor) (Coutinho et al., J. Mol. Biol. 328 (2003) 307-317)。這些醣基轉移酶是生物科技學者合成寡醣的來源,且亦用於(化學)酵素方法以及細胞生產系統中。然而,醣基轉移酶與身為醣基轉移轉移酶一份子的半乳醣基轉移酶的立體特異性(stereospecificity)與位置選擇性(regioselectivity)仍是一項艱鉅的挑戰。此外,化學酵素方法需要於原位(in situ)再生核苷酸糖供給者。雙醣與寡醣的細胞生產需要在互補醣基轉移酶附近嚴格控管足夠水平的核苷酸糖供給者的時空可用性。
本發明的一目的是提供可以有效率、省時與經濟實惠的方式生產半乳糖化雙醣與寡醣的工具與方法,若有需要,也可以連續的製程生產半乳糖化雙醣與寡醣。
根據本發明,藉由提供一種新型半乳糖基轉移酶在生產半乳糖化雙醣與寡醣的用途、生產半乳糖化雙醣...
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